Praktinis CRISPR laboratorijos darbas „Kodų laužytojai. CRISPR naudojimas genetikai perrašyti“

Atraskite genų redagavimo pasaulį ir ištirkite neįtikėtiną CRISPR technologijos galią tiesiog savo klasėje! Šiame eksperimente mokiniai tyrinėja pažangiausią genetinę inžineriją, naudodami CRISPR-Cas9, kad pašalintų violetinės spalvos chromogeninius genus klasėje saugiose bakterijose. Be to, mokiniai patys išbando CRISPR-Cas9 specifiškumą, naudodami nespecifinius CRISPR gRNA šablonus ir analizuodami rezultatus.

• Šiame išsamiame eksperimente tyrinėkite genetinę inžineriją, CRISPR ir molekulinės biologijos pagrindus.
• Transformuokite klasėje saugias E. coli bakterijas naudodami CRISPR RNR šablonus, kad patikrintumėte technologijos tikslinį specifiškumą.
• Nustatykite sėkmingą genų išjungimą pagal ląstelių spalvą.
Rinkinyje esančių medžiagų pakanka 10 darbo grupių.

SVARBU! Norint atlikti eksperimentą reikia turėti: Automatinę mikropipetę (5–50 µl) ir antgalius, dvi vandens voneles (37 °C ir 42 °C), inkubacijos krosnelę (nebūtina, bet rekomenduojama), termometrą, centrifugą (-as), vorteksus (nebūtinas), plūduriuojančius stelažus, pipetės įsiurbiklius, ledo, žymeklius, lipnią juostą, kaitinimo plokštę arba mikrobangų krosnelę ir karščiui atsparias pirštinės.